摘要

自體嵌合抗原受體T細(xì)胞(chimeric antigen receptor T cell, CAR-T)產(chǎn)品近年來(lái)成為生物制品研發(fā)和申報(bào)熱點(diǎn), 由于其生產(chǎn)工藝復(fù)雜、研究經(jīng)驗(yàn)尚在積累, 為該類品種上市后的藥學(xué)變更研究帶來(lái)了較大挑戰(zhàn)。本文就近年來(lái)體外基因修飾自體CAR-T產(chǎn)品上市后藥學(xué)變更的申報(bào)和審評(píng)情況以及細(xì)胞生產(chǎn)工藝變更、病毒載體生產(chǎn)工藝變更、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)變更、生產(chǎn)用原材料變更、有效期延長(zhǎng)、包裝和運(yùn)輸條件變更等現(xiàn)階段常見(jiàn)藥學(xué)變更事項(xiàng)的研究思路和審評(píng)技術(shù)考慮進(jìn)行探討, 以供企業(yè)參考。

關(guān)鍵詞

自體嵌合抗原受體T細(xì)胞產(chǎn)品; 上市后藥學(xué)變更; 研究思路; 審評(píng)考慮

體外基因修飾的嵌合抗原受體T細(xì)胞(chimeric antigen receptor T cell, CAR-T)產(chǎn)品在過(guò)去幾十年間發(fā)展迅猛, 特別是在血液惡性腫瘤的臨床治療中展現(xiàn)出了高響應(yīng)率和長(zhǎng)期緩解潛力的可觀成果, CAR-T細(xì)胞療法已成為對(duì)抗腫瘤最具前景的治療選擇之一。

由于自體CAR-T產(chǎn)品創(chuàng)新性高、技術(shù)迭代快, 已批準(zhǔn)的該類產(chǎn)品上市后出于供應(yīng)鏈穩(wěn)定、降低生產(chǎn)成本、提高生產(chǎn)效率等方面考慮或者生產(chǎn)用原材料自身發(fā)生變更等原因引發(fā)了主動(dòng)或被動(dòng)的上市后變更。由于研究經(jīng)驗(yàn)仍在積累且其生產(chǎn)工藝復(fù)雜, 自體CAR-T產(chǎn)品的上市后藥學(xué)變更相較于成熟生物制品而言, 對(duì)企業(yè)和監(jiān)管機(jī)構(gòu)均帶來(lái)了較大挑戰(zhàn)。本文結(jié)合目前自體CAR-T產(chǎn)品上市后藥學(xué)變更的申報(bào)和審評(píng)情況進(jìn)行了變更研究的初步探討, 以期為后續(xù)CAR-T產(chǎn)品的藥學(xué)變更研究提供參考。

1自體CAR-T產(chǎn)品上市后變更申報(bào)情況

截至2025年8月, 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局共批準(zhǔn)7款自體CAR-T產(chǎn)品上市(見(jiàn)表1), 包括CD19和B細(xì)胞成熟抗原(B cell maturation antigen, BCMA)這2個(gè)靶點(diǎn), 首次批準(zhǔn)的適應(yīng)證集中在血液瘤領(lǐng)域, 上市后適應(yīng)證范圍仍不斷擴(kuò)大。

自體嵌合抗原受體T細(xì)胞產(chǎn)品上市后藥學(xué)變更申報(bào)情況和審評(píng)考慮

自首款自體CAR-T產(chǎn)品上市以來(lái), 截至2025年5月31日, 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心共完成涉及藥學(xué)變更的自體CAR-T產(chǎn)品上市后補(bǔ)充申請(qǐng)30件, 共55個(gè)藥學(xué)變更事項(xiàng), 其中CAR-T細(xì)胞相關(guān)變更事項(xiàng)占比62%、病毒載體相關(guān)變更事項(xiàng)占比31%、質(zhì)粒相關(guān)變更事項(xiàng)占比7%。全部申請(qǐng)事項(xiàng)中, 申請(qǐng)數(shù)量較多的為病毒載體質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)變更11個(gè)、CAR-T細(xì)胞生產(chǎn)工藝相關(guān)變更7個(gè)、CAR-T細(xì)胞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)變更6個(gè)(見(jiàn)圖1)。

自體嵌合抗原受體T細(xì)胞產(chǎn)品上市后藥學(xué)變更申報(bào)情況和審評(píng)考慮

從上市后變更的申報(bào)量可以看出企業(yè)在獲批上市后仍在持續(xù)優(yōu)化和完善藥學(xué)研究工作, 在審評(píng)過(guò)程中也能發(fā)現(xiàn)隨著工藝研究的逐步深入、研究數(shù)據(jù)的逐步累計(jì), 企業(yè)能夠主動(dòng)開(kāi)展較為復(fù)雜的變更事項(xiàng), 并且在變更研究早期能主動(dòng)與藥品審評(píng)中心進(jìn)行溝通交流。由于該類產(chǎn)品生產(chǎn)工藝復(fù)雜, 質(zhì)量研究手段有限, 其變更較難統(tǒng)一研究策略, 即使同一變更事項(xiàng), 也可能存在不同的研究策略, 因此建議就變更研究策略加強(qiáng)與監(jiān)管機(jī)構(gòu)的溝通。

2自體CAR-T產(chǎn)品上市后變更的研究思路

現(xiàn)階段已批準(zhǔn)的自體CAR-T產(chǎn)品生產(chǎn)工藝均較為復(fù)雜, 一般涉及質(zhì)粒(使用慢病毒載體生產(chǎn)的CAR-T細(xì)胞)、病毒載體和CAR-T產(chǎn)品3個(gè)生產(chǎn)階段, 其上市后可能涉及的變更事項(xiàng)也較為復(fù)雜。本文結(jié)合目前該類產(chǎn)品上市后藥學(xué)變更的實(shí)際申報(bào)事項(xiàng), 對(duì)不同類別變更事項(xiàng)的一般研究思路以及可比性標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定進(jìn)行初步探討。

2.1 一般變更事項(xiàng)

自體CAR-T產(chǎn)品藥學(xué)研究中的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(含分析方法)、包裝容器、運(yùn)輸條件、有效期等的變更研究與其他生物制品研究思路基本一致, 可參考既往已發(fā)布的相關(guān)指南開(kāi)展研究[2-3], 同時(shí)在研究中需要考慮到CAR-T細(xì)胞階段的制劑一般為低溫凍存, 需要關(guān)注細(xì)胞制劑的細(xì)胞活率、細(xì)胞數(shù)量、生物學(xué)活性等質(zhì)量屬性在凍存前后的變化以及與產(chǎn)品接觸的包裝容器在低溫條件下的密封性是否滿足要求。

2.2 CAR-T細(xì)胞生產(chǎn)工藝變更

盡管CAR-T細(xì)胞領(lǐng)域?qū)λ幤焚|(zhì)量屬性和工藝的理解正在快速加深, 但目前大多數(shù)CAR-T細(xì)胞產(chǎn)品的表征尚不明確, 特別是在分子層面可能尚未完全研究透徹。鑒于當(dāng)前產(chǎn)品表征研究的局限性, 生產(chǎn)、檢測(cè)技術(shù)的復(fù)雜性以及產(chǎn)品質(zhì)量屬性與體內(nèi)數(shù)據(jù)的相關(guān)性仍不明確等風(fēng)險(xiǎn)因素, 評(píng)估其生產(chǎn)工藝變更的影響相較于傳統(tǒng)生物制品往往具有較大挑戰(zhàn), 也較難形成統(tǒng)一的研究策略。由于上述產(chǎn)品特殊性, 此類產(chǎn)品的變更研究有時(shí)難以僅憑藥學(xué)可比性研究數(shù)據(jù)證明工藝可比性, 往往需要多學(xué)科協(xié)同論證以證明生產(chǎn)工藝變更未對(duì)產(chǎn)品的質(zhì)量、安全性和有效性造成負(fù)面影響, 但自體CAR-T產(chǎn)品變更研究基本原則仍可參考已發(fā)布的生物制品變更指南。

由于自體細(xì)胞產(chǎn)品起始原材料的變異性, 在工藝變更研究中可能會(huì)掩蓋工藝變更引起的變化, 因此監(jiān)管機(jī)構(gòu)近期發(fā)布的變更研究指南中均建議在自體CAR-T產(chǎn)品的工藝變更研究中使用等分血(即相同供者細(xì)胞一分為二)的方法[4-6], 減少供者變異的影響, 以便更清晰地評(píng)價(jià)工藝的變更。減少供者個(gè)體差異的影響應(yīng)作為企業(yè)在細(xì)胞工藝變更研究設(shè)計(jì)中的重要考慮點(diǎn), 同時(shí)應(yīng)考慮供者之間的差異, 因此建議盡可能使用多個(gè)供者細(xì)胞開(kāi)展研究。自體CAR-T產(chǎn)品上市后變更研究中往往較難獲取臨床患者材料開(kāi)展可比性研究, 對(duì)于使用健康供者細(xì)胞開(kāi)展變更研究時(shí)企業(yè)應(yīng)評(píng)估健康供者細(xì)胞的代表性, 結(jié)合以上考量點(diǎn)以及該類產(chǎn)品本身的特點(diǎn)(如有較多的人工操作、檢測(cè)方法本身的變異性等), 建議持續(xù)收集如臨床研究批次、商業(yè)化批次等關(guān)鍵批次的工藝和質(zhì)量研究數(shù)據(jù), 并分析關(guān)鍵批次生產(chǎn)中出現(xiàn)的偏差、異常數(shù)據(jù)等原因, 在可比性研究中作為支持性數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì), 進(jìn)而更全面地了解產(chǎn)品的變化。

目前CAR-T細(xì)胞生產(chǎn)工藝中工藝過(guò)程控制大多考慮細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞活率、CAR陽(yáng)性率等指標(biāo), 并未深度挖掘生產(chǎn)工藝對(duì)細(xì)胞質(zhì)量的影響。雖然現(xiàn)階段對(duì)于CAR-T細(xì)胞生產(chǎn)工藝參數(shù)與其質(zhì)量屬性之間關(guān)系的認(rèn)知尚不明確, 但近年來(lái)有研究證明T細(xì)胞的干性、記憶與效應(yīng)功能對(duì)于CAR-T細(xì)胞的臨床療效具有重要影響, T細(xì)胞亞群中的初始/干性細(xì)胞記憶T細(xì)胞(naive T/stem cell memory T cell, TN/SCM)生產(chǎn)的初始/干性記憶CAR-T細(xì)胞(CAR-TN/SCM)在體內(nèi)具有更強(qiáng)的擴(kuò)增能力、更持久的存續(xù)性, 這也是實(shí)現(xiàn)完全應(yīng)答并預(yù)防復(fù)發(fā)的關(guān)鍵因素, 同時(shí)TN/SCM可以減輕細(xì)胞耗竭并改善記憶表型, 不易引發(fā)嚴(yán)重細(xì)胞因子釋放綜合征, 具有更好的安全性。而生產(chǎn)工藝中工藝參數(shù)(如細(xì)胞因子、代謝物、氨基酸、培養(yǎng)條件及生物反應(yīng)器類型)能通過(guò)降低或阻斷細(xì)胞糖酵解代謝并增強(qiáng)氧化磷酸化調(diào)控體外培養(yǎng)中的T細(xì)胞分化過(guò)程, 以獲得干性細(xì)胞記憶T細(xì)胞(stem cell memory T cell, TSCM)和中央記憶T細(xì)胞(central memory T cell, TCM)等低分化狀態(tài)的細(xì)胞群, 維持T細(xì)胞療法的持久性和有效性[9-10]。工藝過(guò)程控制可采用不同的技術(shù)測(cè)量和分析T細(xì)胞生產(chǎn)過(guò)程中的培養(yǎng)基(細(xì)胞因子、代謝物、氨基酸水平)、培養(yǎng)環(huán)境(溫度、pH值、溶解氧)以及細(xì)胞表型, 以實(shí)現(xiàn)有效的工藝過(guò)程控制。這些研究均為CAR-T細(xì)胞生產(chǎn)工藝的研究以及關(guān)鍵工藝參數(shù)的確認(rèn)提供了參考, 也建議企業(yè)在變更研究中設(shè)置更細(xì)致的工藝比對(duì)研究方案, 充分積累研究數(shù)據(jù)以幫助建立工藝、質(zhì)量和臨床有效性三者之間的關(guān)系。

2.3 原材料變更

對(duì)于CAR-T細(xì)胞生產(chǎn)用原材料的變更, 若該原材料對(duì)于細(xì)胞的生產(chǎn)具有較大影響(如單采血、生產(chǎn)過(guò)程中添加的細(xì)胞因子、病毒載體等)或評(píng)估后認(rèn)為對(duì)細(xì)胞質(zhì)量影響較為復(fù)雜(如細(xì)胞培養(yǎng)裝置的變更), 應(yīng)參考CAR-T細(xì)胞工藝變更研究思路開(kāi)展研究。

CAR-T產(chǎn)品使用的病毒載體作為關(guān)鍵原材料, 其生產(chǎn)工藝、質(zhì)量控制等較為復(fù)雜。對(duì)于變更風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別較為明確的病毒載體變更, 如分析方法變更、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)變更、按照已批準(zhǔn)流程新建工作細(xì)胞庫(kù)、新增生產(chǎn)線(不伴隨工藝變更)等變更事項(xiàng), 其研究策略的制定可借鑒其他成熟生物制品的經(jīng)驗(yàn), 在病毒階段完成變更研究。

由于病毒載體的質(zhì)量表征手段仍在不斷發(fā)展, 現(xiàn)有檢測(cè)方法的變異性相對(duì)較大, 建議采用ICH Q9(R1)的理念充分評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)的病毒變更事項(xiàng), 對(duì)于影響較為復(fù)雜的變更事項(xiàng), 如病毒生產(chǎn)用宿主細(xì)胞系變更、下游純化增加層析步驟等生產(chǎn)工藝變更, 可能需要結(jié)合CAR-T細(xì)胞階段的研究數(shù)據(jù)判斷變更前后的可比性。

2.4 CAR-T細(xì)胞的可比性數(shù)據(jù)分析

對(duì)于經(jīng)評(píng)估可能影響產(chǎn)品質(zhì)量的變更, 變更的可比性分析往往需要結(jié)合變更前的多批次數(shù)據(jù)設(shè)置合理的可比性接受標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于成熟生物制品, 由于其生產(chǎn)工藝和分析方法的成熟度和穩(wěn)健性較好, 因此通常會(huì)采用(平均值±nSD)、95%/99%容忍區(qū)間等方法進(jìn)行可比性標(biāo)準(zhǔn)的設(shè)置。細(xì)胞產(chǎn)品相較于其他生產(chǎn)成熟生物制品存在對(duì)工藝的理解尚在積累、人工操作引入的變異較多、分析方法變異較大等挑戰(zhàn), 因此較難采用單一統(tǒng)計(jì)分析方法進(jìn)行可比性標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置。基于現(xiàn)有認(rèn)知, 對(duì)于數(shù)值型數(shù)據(jù)目前可能采用95%/99%容忍區(qū)間、(平均數(shù)±nSD)等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法, 并輔以區(qū)間范圍、箱型圖等多種數(shù)據(jù)展示方式進(jìn)行數(shù)據(jù)分析, 同時(shí)建議在使用等分血研究策略的變更研究中進(jìn)行配對(duì)差異分析(paired difference analysis)。由于現(xiàn)階段對(duì)于該類產(chǎn)品的認(rèn)知有限, 因此更加鼓勵(lì)使用正交的方法, 采用多種適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)學(xué)工具進(jìn)行可比性分析, 以更全面地評(píng)價(jià)研究結(jié)果。同時(shí), 設(shè)定可接受標(biāo)準(zhǔn)時(shí)每個(gè)質(zhì)量屬性的驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)建議與生物學(xué)意義進(jìn)行關(guān)聯(lián), 因?yàn)榻y(tǒng)計(jì)學(xué)存在顯著性差異也可能沒(méi)有生物學(xué)意義; 而無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異也可能僅表明缺乏統(tǒng)計(jì)學(xué)效力, 并非工藝之間沒(méi)有差異。

3自體CAR-T產(chǎn)品上市后變更常見(jiàn)事項(xiàng)的審評(píng)考慮

3.1 原材料變更

3.1.1 一般原材料

CAR-T產(chǎn)品/病毒載體生產(chǎn)和檢驗(yàn)通常涉及較多原材料, 出于供應(yīng)鏈穩(wěn)定性考慮而進(jìn)行供貨商變更可能引起原材料級(jí)別和標(biāo)準(zhǔn)變更, 一般情況下變更后的級(jí)別不應(yīng)低于變更前。同一原材料不同供貨商的檢驗(yàn)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)可能存在差異, 此種情況下應(yīng)基于風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估, 如該原材料為《中華人民共和國(guó)藥典》收錄, 變更后應(yīng)至少滿足《中華人民共和國(guó)藥典》要求, 同時(shí)在此基礎(chǔ)上還應(yīng)評(píng)估變更后原材料的檢測(cè)結(jié)果是否滿足擬定的原材料控制標(biāo)準(zhǔn)。原材料內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)的制定應(yīng)基于目標(biāo)產(chǎn)品的生產(chǎn)和質(zhì)量需求而不應(yīng)僅基于供貨商的檢驗(yàn)報(bào)告。對(duì)于關(guān)鍵原材料的變更, 如核酸酶、細(xì)胞因子等, 還應(yīng)使用變更前后的原材料進(jìn)行病毒載體/CAR-T細(xì)胞的生產(chǎn), 以進(jìn)一步評(píng)估可比性。

病毒載體生產(chǎn)用質(zhì)粒作為病毒生產(chǎn)的關(guān)鍵原材料, 其變更可能對(duì)病毒載體產(chǎn)生較大影響。目前上市后較常見(jiàn)的質(zhì)粒變更包括按照已批準(zhǔn)流程新建工作種子庫(kù)、新增生產(chǎn)線(工藝和標(biāo)準(zhǔn)不變), 此類變更可參考《已上市生物制品藥學(xué)變更研究技術(shù)指導(dǎo)原則(試行)》開(kāi)展適當(dāng)研究。根據(jù)既往對(duì)質(zhì)粒質(zhì)量研究和控制情況, 可能會(huì)延伸至病毒載體階段進(jìn)行可比性研究, 以支持質(zhì)粒的變更。

3.1.2 起始原材料

單采血作為CAR-T產(chǎn)品生產(chǎn)的起始原材料, 如上市后擬變更單采程序/設(shè)備, 應(yīng)基于對(duì)單采設(shè)備和單采程序的認(rèn)知, 明確變更前后的采集邏輯和采集樣品組成是否存在差異, 基于變更前后的差異開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估并合理設(shè)計(jì)可比性研究方案, 以證明變更前后產(chǎn)品質(zhì)量可比。目前自體細(xì)胞治療產(chǎn)品的單采血采集階段均委托合作醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行, 在該類產(chǎn)品上市審評(píng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn), 部分企業(yè)對(duì)單采血采集存在不清楚單采設(shè)備/程序、未制定單采血采集操作過(guò)程的關(guān)鍵控制指標(biāo)等情況, 企業(yè)應(yīng)加強(qiáng)主體責(zé)任意識(shí), 對(duì)產(chǎn)品全流程進(jìn)行有效控制。

3.1.3 病毒載體生產(chǎn)工藝變更

目前病毒載體生產(chǎn)工藝的上市后變更包括3種情況。①病毒載體新增生產(chǎn)線、工藝不變; ②新增生產(chǎn)廠/新增生產(chǎn)線, 并在主要工藝流程不變的情況下, 對(duì)生產(chǎn)工藝進(jìn)行優(yōu)化, 如減少動(dòng)物源性物料使用、優(yōu)化工藝提高收率等; ③病毒新增生產(chǎn)廠, 伴隨生產(chǎn)工藝發(fā)生重大變更, 如貼壁工藝變更為懸浮工藝、下游純化增加工藝步驟等。對(duì)于第一種情況, 可按照已發(fā)布生物制品上市后變更相關(guān)指南開(kāi)展病毒載體的可比性研究, 新生產(chǎn)線生產(chǎn)的病毒質(zhì)量應(yīng)不劣于已批準(zhǔn)生產(chǎn)線。對(duì)于第二種情況, 由于目前對(duì)病毒載體的表征研究尚不充分, 因此除在病毒階段開(kāi)展全面的可比性研究外, 還應(yīng)在CAR-T細(xì)胞階段開(kāi)展可比性研究, 明確病毒變更對(duì)于最終產(chǎn)品的影響。對(duì)于第三種情況, 由于上游貼壁生產(chǎn)和懸浮生產(chǎn)使用的生產(chǎn)用宿主細(xì)胞發(fā)生變化, 且2種培養(yǎng)方式對(duì)于病毒載體質(zhì)量的影響存在較明顯差異, 同時(shí)基于現(xiàn)階段對(duì)于該類產(chǎn)品的認(rèn)知, 該類變更除考慮病毒載體和CAR-T細(xì)胞的藥學(xué)全面可比性研究外, 可能需要涉及非臨床和臨床橋接研究。

以上舉例僅基于現(xiàn)階段已上市產(chǎn)品的變更申報(bào)情況, 實(shí)際研究中病毒生產(chǎn)工藝的變更可能存在更復(fù)雜的情況, 建議在對(duì)變更風(fēng)險(xiǎn)充分評(píng)估的基礎(chǔ)上, 提前與監(jiān)管機(jī)構(gòu)進(jìn)行溝通, 以幫助擬定合理的變更研究策略。

3.2 CAR-T細(xì)胞生產(chǎn)工藝變更

自體細(xì)胞治療產(chǎn)品上市后, 會(huì)出現(xiàn)已批準(zhǔn)產(chǎn)能無(wú)法滿足實(shí)際生產(chǎn)需求的情況。目前常見(jiàn)的產(chǎn)能增加申請(qǐng)主要為生產(chǎn)工藝不變的情況下, 在已批準(zhǔn)生產(chǎn)區(qū)增加生產(chǎn)頻次或者鏡像增加生產(chǎn)模塊的變更。該類變更的研究可參考近期發(fā)布的《自體CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品藥學(xué)變更研究的問(wèn)題與解答》和《細(xì)胞治療藥品藥學(xué)變更研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則(征求意見(jiàn)稿)》中的相關(guān)要求開(kāi)展。

常見(jiàn)的自體CAR-T產(chǎn)品上市后的工藝變更包括: 變更/增加起始原材料的處理工藝、增加一次性組件、收緊關(guān)鍵工藝參數(shù)范圍如感染復(fù)數(shù)(multiplic-ity of infection, MOI)等。對(duì)于CAR-T細(xì)胞的工藝變更, 應(yīng)明確變更原因, 合理地設(shè)計(jì)和規(guī)劃產(chǎn)品的變更。對(duì)于可能影響完整工藝流程的變更, 應(yīng)從工藝性能、工藝過(guò)程樣品的質(zhì)量、細(xì)胞制劑放行檢測(cè)數(shù)據(jù)、擴(kuò)展的表征研究、穩(wěn)定性等方面開(kāi)展全面的變更前后可比性研究。對(duì)于僅部分獨(dú)立工序發(fā)生變更的, 應(yīng)合理選擇工藝過(guò)程樣品進(jìn)行比對(duì), 例如: 變更后的過(guò)程樣品如涉及長(zhǎng)期存儲(chǔ)的, 除過(guò)程樣品本身的穩(wěn)定性研究外, 應(yīng)考慮使用穩(wěn)定性末過(guò)程樣品進(jìn)行后續(xù)細(xì)胞生產(chǎn)以證明存儲(chǔ)后樣品可滿足生產(chǎn)需求。由于目前對(duì)于CAR-T細(xì)胞的質(zhì)量控制手段有限, 因此在變更可比性研究中除常規(guī)的檢測(cè)項(xiàng)目外，建議盡可能多地開(kāi)展擴(kuò)展表征的研究進(jìn)行比對(duì), 考慮對(duì)不同分化程度的T細(xì)胞亞群進(jìn)行控制, 如初始T細(xì)胞(Tn)、TCM、效應(yīng)記憶T細(xì)胞(TEM)、TSCM等多個(gè)亞群進(jìn)行檢測(cè), 并考慮對(duì)細(xì)胞耗竭相關(guān)表型進(jìn)行檢測(cè), 進(jìn)行多種細(xì)胞因子分泌的檢測(cè)、多種原理的細(xì)胞殺傷檢測(cè)等。同時(shí)也鼓勵(lì)采用單細(xì)胞測(cè)序等分子層面的研究手段, 累積轉(zhuǎn)錄組學(xué)的研究數(shù)據(jù), 識(shí)別與工藝、臨床有效性相關(guān)的關(guān)鍵質(zhì)量屬性。

3.3 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)變更

對(duì)于上市后質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)變更, 質(zhì)粒和病毒載體現(xiàn)階段主要的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)變更包括: 新增/變更檢驗(yàn)廠、分析方法優(yōu)化、變更質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)范圍、方法變更同時(shí)變更質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)范圍。對(duì)于優(yōu)化分析方法、新增檢驗(yàn)廠, 應(yīng)完成變更/轉(zhuǎn)移后的方法學(xué)驗(yàn)證、橋接研究等。對(duì)于方法優(yōu)化且優(yōu)化后的方法性能明顯提升導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果發(fā)生變化的, 應(yīng)基于經(jīng)臨床或商業(yè)化驗(yàn)證的多批次質(zhì)粒/病毒載體在方法變更前后的檢測(cè)數(shù)據(jù), 統(tǒng)計(jì)分析方法變更前后檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性, 合理擬定變更后的標(biāo)準(zhǔn)范圍。如變更前后無(wú)明確相關(guān)性, 應(yīng)依據(jù)使用變更后方法的多批次檢測(cè)數(shù)據(jù)合理擬定標(biāo)準(zhǔn)。如因上市時(shí)擬定的標(biāo)準(zhǔn)范圍在商業(yè)化階段不適用而擬變更標(biāo)準(zhǔn)范圍的, 應(yīng)提供充分依據(jù)進(jìn)行支持, 特別是經(jīng)體內(nèi)研究驗(yàn)證的數(shù)據(jù)。

現(xiàn)階段CAR-T細(xì)胞的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)變更主要包括: 依據(jù)上市批件要求新增檢項(xiàng)、《中華人民共和國(guó)藥典》方法之間的變更、收緊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等。此類變更應(yīng)對(duì)新增/變更的分析方法開(kāi)展方法學(xué)驗(yàn)證, 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的收緊應(yīng)基于臨床和商業(yè)化積累的多批次數(shù)據(jù)合理擬定。

3.4 病毒載體或細(xì)胞制劑效期延長(zhǎng)、關(guān)鍵中間體的有效期延長(zhǎng)

有效期延長(zhǎng)應(yīng)提供代表性工藝多批次樣品的長(zhǎng)期穩(wěn)定性研究數(shù)據(jù)和趨勢(shì)分析圖, 明確病毒載體/細(xì)胞制劑在穩(wěn)定性考察期間的穩(wěn)定性變化趨勢(shì)。對(duì)于存在明顯變化的檢項(xiàng)應(yīng)充分分析其對(duì)樣品安全性、有效性的影響。

部分細(xì)胞生產(chǎn)工藝可能涉及過(guò)程樣品暫存, 細(xì)胞生產(chǎn)過(guò)程樣品的質(zhì)量影響后續(xù)生產(chǎn)工序以及最終制劑的質(zhì)量情況。目前細(xì)胞治療產(chǎn)品過(guò)程檢測(cè)可使用的檢測(cè)手段較少, 因此過(guò)程樣品效期延長(zhǎng)不應(yīng)僅考慮過(guò)程樣品自身的長(zhǎng)期穩(wěn)定性檢測(cè)數(shù)據(jù), 還應(yīng)使用穩(wěn)定性末過(guò)程樣品進(jìn)行后續(xù)細(xì)胞制劑生產(chǎn), 結(jié)合后續(xù)的細(xì)胞生產(chǎn)過(guò)程控制和質(zhì)量情況綜合評(píng)估。考慮到不同供者來(lái)源單采血的個(gè)體差異, 如可行則建議采用同一供者樣品開(kāi)展中間體穩(wěn)定性研究, 并與臨床批次和變更前商業(yè)化批次的數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì)。

3.5 制劑包材變更

細(xì)胞制劑常見(jiàn)的內(nèi)包材為凍存袋或凍存管。無(wú)論是企業(yè)基于自身對(duì)于供應(yīng)鏈穩(wěn)定性的需求進(jìn)行的主動(dòng)變更或由于包材生產(chǎn)商自身變更而引起的被動(dòng)變更, 申請(qǐng)人均需要明確變更前后包材的材質(zhì)、組成、規(guī)格、生產(chǎn)工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(包材檢測(cè)報(bào)告和入場(chǎng)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn))等的變化情況, 建議對(duì)使用變更后包材的制劑至少開(kāi)展長(zhǎng)期穩(wěn)定性、使用中穩(wěn)定性考察, 并與變更前數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì), 變更后穩(wěn)定性不應(yīng)劣于變更前。對(duì)于變更后內(nèi)包材應(yīng)開(kāi)展相容性評(píng)估/研究, 特別是材質(zhì)存在差異的包材組件, 同時(shí)考察變更后包裝材料的密封性是否符合要求。

3.6 運(yùn)輸條件變更

目前已批準(zhǔn)的自體CAR-T產(chǎn)品均為冷凍保存和運(yùn)輸。細(xì)胞制劑在完成生產(chǎn)后以冷凍狀態(tài)運(yùn)輸至回輸?shù)尼t(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行后續(xù)回輸操作, 由于不同地區(qū)的合作醫(yī)療機(jī)構(gòu)在運(yùn)輸距離和地理環(huán)境上存在較大差異, 因此在早期設(shè)計(jì)制劑運(yùn)輸方式時(shí)不僅要充分考慮產(chǎn)品本身對(duì)于運(yùn)輸條件的要求, 如運(yùn)輸溫度、運(yùn)輸時(shí)間等, 同時(shí)應(yīng)考慮商業(yè)化后運(yùn)輸?shù)谋憬菪院蛷?fù)雜運(yùn)輸條件下運(yùn)輸方式的溫度保持能力。在臨床研究期間應(yīng)結(jié)合臨床樣品的運(yùn)輸情況, 確認(rèn)最終商業(yè)化的運(yùn)輸方式和運(yùn)輸條件, 并在上市申報(bào)前完成運(yùn)輸驗(yàn)證。

4總結(jié)和展望

由于CAR-T產(chǎn)品的自身特點(diǎn), 其藥學(xué)變更對(duì)企業(yè)和監(jiān)管機(jī)構(gòu)帶來(lái)了很多挑戰(zhàn), 上述上市后變更案例和審評(píng)考慮僅基于部分上市后變更的研究情況和現(xiàn)階段對(duì)該類產(chǎn)品的認(rèn)知進(jìn)行討論。隨著自體CAR-T產(chǎn)品批準(zhǔn)上市數(shù)量的增加以及持有人降低生產(chǎn)成本、提高產(chǎn)品可及性的需求越來(lái)越迫切, 未來(lái)該類產(chǎn)品的藥學(xué)變更情形將會(huì)更加復(fù)雜, 因此與監(jiān)管機(jī)構(gòu)溝通對(duì)于該類產(chǎn)品更加重要。由于現(xiàn)階段科學(xué)認(rèn)知有限、行業(yè)成熟度相對(duì)較低、監(jiān)管經(jīng)驗(yàn)相對(duì)較少等問(wèn)題, 目前行業(yè)和監(jiān)管機(jī)構(gòu)對(duì)于該類產(chǎn)品變更的管理模式還在不斷完善, 各方對(duì)變更的分類界定可能存在差異[13-14]。未來(lái)隨著該類產(chǎn)品生產(chǎn)工藝研究和病毒載體、細(xì)胞質(zhì)量屬性表征研究的深入以及生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)的積累等, 將逐步建立完善質(zhì)量與工藝的相關(guān)性以及藥學(xué)研究與臨床研究數(shù)據(jù)的相關(guān)性評(píng)價(jià)體系。隨著各級(jí)監(jiān)管機(jī)構(gòu)監(jiān)管經(jīng)驗(yàn)的逐步積累、監(jiān)管工具的逐步豐富, 對(duì)于自體CAR-T產(chǎn)品的科學(xué)認(rèn)知將會(huì)更加深入, 上市后變更的監(jiān)管也將會(huì)更加成熟和靈活, 這都將更好地促進(jìn)行業(yè)發(fā)展以滿足患者的用藥需求。

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